Precauciones para el uso del sistema de análisis de imágenes en gel

Con la popularización gradual de la investigación en biología molecular, la demanda de sistemas de imágenes en gel en China está creciendo. Independientemente del propósito, los componentes del sistema de imágenes de gel son similares y consisten en un sistema de disparo, una caja oscura con una fuente de luz especial y un software para adquirir y analizar imágenes de gel.

1. ¿Qué es un sistema de análisis de imágenes en gel?

Las imágenes en gel son la detección y el análisis de imágenes no quimioluminiscentes de diferentes tinciones de electroforesis en gel, como ADN/ARN/proteína (como EB, azul brillante de Coomassie, tinción con plata, verde SYBR) y microplacas, platos planos, etc. Sistema de imágenes en gel se puede utilizar para investigaciones rutinarias de bioingeniería, como cálculo de peso molecular, escaneo de densidad, cuantificación de densidad, cuantificación por PCR, etc.

2. Clasificación del sistema de análisis de imágenes en gel.
Sistema general de análisis de imágenes en gel.
Puede recopilar imágenes de gel de electroforesis de proteínas y muestras de gel de ADN y realizar análisis cualitativos y cuantitativos. Las muestras incluyen: monitoreo de ácido nucleico teñido con EB, SYBRGreen, SYBRGold, TexasRed, GelStar, Fluoroscecin, RadiantRed, etc.; y geles de proteínas teñidos con CoomassieBlue, SYPROOrange, varios tintes, como tinte de vaca, etc. (o UV, EB e imágenes de muestras visibles y coloreadas).

Sistema de análisis de imágenes por quimioluminiscencia.
El sistema de imágenes en gel cubre imágenes de muestras visibles y coloreadas, UV, EB, quimioluminiscencia, fluorescencia ultravioleta.

Sistema de análisis de imágenes de fluorescencia multicolor
La gama de imágenes cubre UV, EB, quimioluminiscencia, fluorescencia multicolor e imágenes de muestras visibles y coloreadas.

Sistema multifuncional de imágenes in vivo UV, EB, quimioluminiscencia, fluorescencia multicolor, imágenes de muestras coloreadas y visibles y tejidos in vitro y animales pequeños y grandes.

3. Principio del sistema de análisis de imágenes en gel.
La tasa de migración de muestras en gel de electroforesis u otros soportes es diferente. La comparación con productos estándar u otros productos estándar alternativos puede realizar un análisis cualitativo de muestras desconocidas. Esta es la base del análisis cualitativo del sistema de análisis de imágenes. Según la posición de las muestras desconocidas en el espectro, se pueden realizar análisis cualitativos sobre ellas para determinar su composición y propiedades.

La muestra absorbe parcialmente la luz proyectada o reflejada, por lo que la densidad óptica de la banda de muestra en la imagen obtenida por fotografía será diferente. La densidad óptica está relacionada linealmente con la concentración o masa de la muestra. Según la densidad óptica de la muestra desconocida, la concentración o masa de la muestra desconocida se puede obtener comparándola con el índice de densidad óptica de la banda de muestra de concentración conocida. Esta es la base del análisis cuantitativo del sistema de análisis de imágenes. La última fuente de luz de transmisión ultravioleta y la fuente de luz de transmisión de luz blanca hacen que la distribución de la luz sea más uniforme y minimizan la influencia de la densidad óptica desigual en los resultados.

4. Ámbito de aplicación del sistema de imágenes en gel.
En general, las imágenes en gel se pueden aplicar a: El sistema de imágenes en gel se puede utilizar para el análisis cualitativo de los resultados de separación y purificación de proteínas, ácidos nucleicos, péptidos, aminoácidos, poliaminoácidos y otras moléculas biológicas.
Cuantificación del peso molecular.
Para películas de ADN de uso común, la función de cuantificación del peso molecular se utiliza para generar automáticamente una curva de ajuste anotando el peso molecular conocido de la banda marcadora de ADN en el gel y utilizándola para medir el peso molecular de la banda desconocida. Los resultados obtenidos con este método son mucho más precisos que la observación a simple vista.

Cuantificación de densidad
El método comúnmente utilizado para determinar la concentración de ADN (ácido desoxirribonucleico) y ARN (ácido ribonucleico) es el método de absorción ultravioleta, pero solo puede determinar la concentración total de nucleótidos en la muestra, pero no puede distinguir la concentración de cada fragmento de longitud. Usando el software y el sistema de imágenes en gel, después de calibrar la densidad de una banda estándar con un contenido de ADN conocido en la película de ADN, puede hacer clic fácilmente en otras bandas desconocidas y compararlas con la densidad de las bandas conocidas para obtener el contenido de ADN desconocido. . Este método también es adecuado para la determinación de la concentración de bandas de gel de proteína PAGE.

Escaneo de densidad
En la investigación de biología molecular y bioingeniería, el método más utilizado es calcular el porcentaje de productos de expresión de proteínas en la proteína bacteriana total. El método tradicional es utilizar un escaneo de densidad dedicado, pero este trabajo se puede completar usando un software de análisis biológico combinado con un escáner equipado de manera rutinaria en el laboratorio o usando directamente luz blanca para irradiar las imágenes del gel.

Cuantificación por PCR
La cuantificación por PCR significa principalmente que si la banda amplificada por el experimento de PCR no es una, entonces el software se puede utilizar para calcular el porcentaje relativo de cada banda en la banda total. En términos de esta función, es similar al escaneo de densidad, pero el principio real es diferente. La cuantificación por PCR consiste en realizar una cuantificación de densidad relativa en las bandas seleccionadas y calcular su porcentaje del total. Durante el escaneo de densidad, se genera y se integra un gráfico de curva de escaneo longitudinal para el área seleccionada.

5. Mantenimiento del sistema de imágenes en gel.
El ciclo de mantenimiento del generador de imágenes en gel suele ser de unas dos semanas. El instrumento debe mantenerse limpio y la periferia de la superficie limpia; Encienda el instrumento y el software, observe si el cable de datos del software está en contacto normal y si la función de operación del software está intacta.

El álbum del instrumento informático debe estar dedicado a evitar infecciones por virus informáticos, que podrían provocar que quede inutilizable. Al mismo tiempo, está prohibido reinstalar el sistema, porque el software del instrumento debe reactivarse después de la reinstalación antes de poder usarse.

Se debe utilizar el método de cierre correcto para la operación de cierre de la caja oscura. El proceso específico consiste en cubrir la puerta de la caja oscura hasta una posición de aproximadamente 60 grados, soltarla y confiar en la gravedad para cerrar la puerta por sí sola. Cabe señalar que está prohibido empujar con fuerza la puerta de la caja oscura para cerrarla.

Durante el proceso normal de uso y mantenimiento, preste atención a mantener limpias la caja de luz ultravioleta y el tablero de luz blanca de proyección para evitar afectar el efecto de imagen de gel del generador de imágenes de gel.

En el proceso de funcionamiento del generador de imágenes en gel, además de utilizar el instrumento correctamente, también es necesario cumplir estrictamente con las normas del laboratorio. El sistema de imágenes en gel puede realizar análisis cualitativos para los resultados de separación y purificación de otras moléculas biológicas como proteínas, ácidos nucleicos, péptidos, aminoácidos y poliaminoácidos.

6. Precauciones para el uso del sistema de imágenes en gel
Primero encienda el sistema de imágenes de gel, luego encienda la computadora e ingrese al software.
Al tomar fotografías de gel ultravioleta, evite que EB contamine el instrumento y no toque la puerta del sistema de imágenes de gel con guantes contaminados.
Durante el proceso de tomar fotografías con fuentes de luz ultravioleta, el panel frontal del sistema de imágenes en gel no se puede abrir.
Después de tomar fotografías, retire el pegamento sobrante y límpielo con un papel más suave.
Sea amable al concentrarse y no se mueva violentamente.
Utilice una fuente de alimentación estabilizada.
Mantenga seco el ambiente interior y limpie a tiempo el agua u otros líquidos que queden en el tablero de observación.
Cuando utilice el instrumento, cierre bien la puerta y la plataforma de observación; de lo contrario, la lámpara ultravioleta no podrá utilizarse normalmente.
Intente no conectar la computadora a Internet o LAN e instale software antivirus en la computadora para asegurarse de que esté dedicada al uso específico.
Cuando el instrumento no se utilice durante un período prolongado, cúbralo con una cubierta antipolvo.
Para prolongar la vida útil de la lámpara, apague la fuente de luz a tiempo después de observar el gel.

El sistema de análisis de imágenes en gel es una herramienta indispensable en la investigación en biología molecular y el diagnóstico clínico. Proporciona a científicos y médicos poderosas herramientas de diagnóstico e investigación a través de imágenes de alta precisión y análisis de software avanzado, que ayudan a comprender y tratar diversas enfermedades. Con el desarrollo continuo de la tecnología, el rendimiento y la gama de aplicaciones del sistema de análisis de imágenes en gel seguirán expandiéndose, haciendo mayores contribuciones al desarrollo de las ciencias biológicas.