Analizador bioquímico: introducción a tres métodos de análisis comúnmente utilizados

Con el avance continuo de la tecnología médica, los analizadores bioquímicos, como una de las herramientas clave para el diagnóstico médico, desempeñan un papel importante en las aplicaciones clínicas. Los analizadores bioquímicos pueden analizar de forma rápida y precisa los componentes químicos de diversas muestras biológicas, proporcionando a los médicos importantes bases de diagnóstico y sugerencias de tratamiento. En este artículo, presentaremos los tres métodos de análisis principales que se utilizan comúnmente en los analizadores bioquímicos para ayudar a todos a comprender mejor el principio de funcionamiento y los escenarios de aplicación de este equipo médico.

Hay tres categorías de métodos de análisis comúnmente utilizados para analizadores bioquímicos: método de punto final, método de tiempo fijo y método cinético.
Método de punto final:

Esto significa que después de un período de reacción, la reacción alcanza el equilibrio. Dado que la constante de equilibrio de la reacción es muy grande, se puede considerar que todos los sustratos (sustancias de prueba) se convierten en productos. La absorbancia de la solución de reacción ya no cambia. y sólo está relacionado con la concentración del analito. Este tipo de método a menudo se denomina método de "punto final" o, más específicamente, método "equilibrado".
Método de punto final de longitud de onda única de un solo reactivo: agregue reactivo (volumen V) en t1, agregue muestra (volumen S) en t2, luego agite y reaccione, luego comience a medir la absorbancia de la solución de reacción y la reacción llega al final punto en t3, t3-t2 para medir el tiempo.
Reactividad: R=At3-At2-1×V/(V+S), o R=At3-ARBLK.
Entre ellos: Ati es la absorbancia en el momento i y ARBLK es la absorbancia del blanco de reactivo.
Método de punto final de longitud de onda dual de reactivo único: Básicamente lo mismo que el "método de punto final de longitud de onda única de reactivo único", excepto que para cada ciclo de medición, la absorbancia real es igual a Aλ1-Aλ2.
Método de punto final de longitud de onda única de reactivo dual: agregue el primer reactivo (volumen V1) en t1, agregue la muestra (volumen S) en t2 y agite inmediatamente, agregue el segundo reactivo (volumen V2) en t3 y agite inmediatamente, y reaccione en t4 Llega al final. t3-t2 es el tiempo de incubación, t4-t3 es el tiempo de medición.
En los parámetros del proyecto, si el tiempo de inicio de la reacción se establece en 0, entonces el grado de reacción R = absorbancia en el momento A - absorbancia del blanco de reactivo doble. Si el tiempo de inicio de la reacción es inferior a 0, entonces el grado de reacción R=At4 - la absorbancia del blanco de reactivo doble - la absorbancia del punto de ajuste entre t3 y t2 × (V1 + S) / (V1 + S + V2). Método de punto final de doble longitud de onda y reactivo dual: Básicamente lo mismo que el "método de punto final de longitud de onda única y reactivo dual", excepto que para cada ciclo de medición, la absorbancia real es igual a Aλ1-Aλ2.

Método de tiempo fijo:
También conocido como método cinético de primer orden, método cinético de dos puntos, etc., significa que dentro de un cierto tiempo de reacción, la velocidad de reacción es proporcional a la primera potencia de la concentración del sustrato, es decir, v = k [ S]. A medida que el sustrato se consume continuamente, toda la velocidad de reacción se reduce continuamente, lo que se manifiesta en un cambio cada vez más pequeño en la absorbancia. Este tipo de reacción tarda mucho en alcanzar el equilibrio y, en teoría, puede controlarse en cualquier momento, sin embargo, debido a la compleja composición del suero, la reacción es más complicada y hay muchas reacciones variadas cuando la reacción recién comienza. Se requiere un período de tiempo antes de que se pueda ingresar al período de reacción estable.
Agregue el reactivo (volumen V) en t1, luego mida la absorbancia del blanco de reactivo, agregue la muestra (volumen S) en t2, la reacción es estable en t3, deje de monitorear la reacción en t4; t2-t3 es el tiempo de retraso , t3-t4 para medir el tiempo.
Reactividad de longitud de onda única (los reactivos simples y dobles son iguales): R=At4—At3
Reactividad de longitud de onda dual: R = (Absorbancia de la longitud de onda principal en el momento t4 - Absorbancia de la longitud de onda secundaria en el momento t4) - (Absorbancia de la longitud de onda principal en el momento t3 - Absorbancia de la longitud de onda secundaria en el momento t3)

Método dinámico:
También conocido como método de cinética de orden cero, significa que la velocidad de reacción es proporcional a la potencia cero de la concentración del sustrato, es decir, no tiene nada que ver con la concentración del sustrato. Por lo tanto, durante todo el proceso de reacción, los reactivos pueden generar un determinado producto a una velocidad uniforme, lo que hace que la absorbancia de la solución medida disminuya o aumente uniformemente a una determinada longitud de onda. La velocidad de disminución o aumento (ΔA/min) es constante con la sustancia medida proporcional a la actividad o concentración. El método cinético también se denomina método de monitorización continua y se utiliza principalmente para determinar la actividad enzimática.
De hecho, dado que la concentración de sustrato no puede ser lo suficientemente grande, a medida que avanza la reacción y el sustrato se consume en cierta medida, la velocidad de reacción ya no es de orden cero, por lo que el método cinético de orden cero está dirigido a un período de tiempo específico. ;De manera similar, debido a la composición compleja del suero, la reacción es más complicada y hay muchas reacciones diversas cuando la reacción recién comienza. Se requiere un período de retraso antes de que se pueda ingresar al período de reacción estable. Cada fabricante de reactivos tiene regulaciones estrictas sobre estos dos periodos.
Agregue el reactivo (volumen V) en t1, agregue la muestra (volumen S) en t2, la reacción es estable en t3 y deje de monitorear la reacción en tn; t3-t2 es el tiempo de retraso y tn-t3 es la medición. tiempo. Reactividad de longitud de onda única (los reactivos simples y dobles son iguales) R = (n∑AT-∑A∑T)/[n∑T2-(∑T)2], donde: n=el número de datos entre t3 y tn, T= Tiempo, A=absorbancia en un momento determinado. La reactividad de longitud de onda dual es básicamente la misma que la de longitud de onda única, excepto que la absorbancia en un momento determinado es igual a la absorbancia de la longitud de onda principal menos la absorbancia de la longitud de onda secundaria.

Escenarios de aplicación
La amplia aplicación de los analizadores bioquímicos ha penetrado en muchos campos médicos como hospitales, clínicas y laboratorios. No sólo se puede utilizar para el diagnóstico clínico para ayudar a los médicos a determinar con precisión el tipo y la gravedad de la enfermedad, sino que también se puede utilizar para el seguimiento de la terapia farmacológica, la evaluación de los efectos del tratamiento y el ajuste de los planes de tratamiento. Además, los analizadores bioquímicos también desempeñan un papel importante en la investigación científica y el desarrollo de nuevos fármacos, realizando importantes contribuciones al avance de la ciencia médica.

Conclusión
Como herramienta importante para el diagnóstico médico y la investigación científica, los analizadores bioquímicos continúan promoviendo el desarrollo y el progreso de la tecnología médica. A través de una variedad de métodos de análisis, como fotometría, electroquímica y química instrumental, los analizadores bioquímicos pueden lograr análisis rápidos y precisos de diversos componentes en muestras biológicas, brindando soporte técnico confiable para el diagnóstico clínico, el tratamiento y la investigación científica. Se cree que con la continua innovación y desarrollo de la tecnología, los analizadores bioquímicos desempeñarán un papel más importante en el futuro y harán mayores contribuciones a la salud humana.